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广州荔米:液相色谱仪操作注意事项

时间:2021-03-12 15:42 点击次数:
 
  流动相:
 
  1、 流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水,酸碱液及缓冲液需经过滤后使用,过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用范围;
 
  2、 水相流动相需经常更换(一般不超过2天),防止长菌变质;
 
  3、 使用双泵时,A、B、C、D四相中,若所用流动相中有含盐流动相,则A、D(进液口位于混合器下方)放置含盐流动相,B、C(进液口位于混合器上方)放置不含盐流动相;
 
  A、B、C、D四个储液器中其中一个为棕色瓶,用于存放水相流动相。 样品:
 
  1、 采用过滤或离心方法处理样品,确保样品中不含固体颗粒;
 
  2、 用流动相或比流动相弱(若为反相柱,则极性比流动相大;若为正相柱,则极性比流动相小)的溶剂制备样品溶液,尽量用流动相制备样品液;
 
  3.手动进样时,进样量尽量小,使用定量管定量时,进样体积应为定量管的3~5倍;
 
  色谱柱:
 
  1、 使用前仔细阅读色谱柱附带的说明书,注意适用范围,如pH值范围、流动相类型等;
 
  2、 使用符合要求的流动相;
 
  3、 使用保护柱;
 
  4、 如所用流动相为含盐流动相,反相色谱柱使用后,先用水或低浓度甲醇水(如5%甲醇水溶液),再用甲醇冲洗。
 
  5、 色谱柱在不使用时,应用甲醇冲洗,取下后紧密封闭两端保存;
 
  6、 不要高压冲洗柱子;
 
  7、 不要在高温下长时间使用硅胶键合相色谱柱;
 
  使用过程中注意轻拿轻放。操作过程:
 
  1、 开机操作:
 
  (1)、打开电源,用Harb相连接时,注意Harb电源,打开计算机,打开Bootp Server(一般启动时已打开);
 
  (2)、自上而下打开个组件电源,Bootp Server里显示有信号时(有六行字符),打开工作站(先打开On line);
 
  (3)、打开冲洗泵头的10%异丙醇溶液的开关(需用针捅抽),控制流量大小,以能流出的最小流量为准;
 
  (4)、注意各流动相所剩溶液的容积设定,若设定的容积低于最低限会自动停泵,注意洗泵溶液的体积,及时加液;
 
  (5)、使用过程中要经常观察仪器工作状态,及时正确处理各种突发事件。
 
  2、 先以所用流动相冲洗系统一定时间(如所用流动相为含盐流动相,必须先用水冲洗20分钟以上再换上含盐流动相),正式进样分析前30min 左右开启D灯或W灯,以延长灯的使用寿命;
 
  3、 建立色谱操作方法,注意保存为自己命名的Method,勿覆盖或删除他人的方法及实验结果;
 
  4、 使用手动进样器进样时,在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒,洗针液一般选择与样品液一致的溶剂,进样前必须用样品液清洗进样针筒3遍以
 
  上,并排除针筒中的气泡;
 
  5、 溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎,在更换流动相时注意保护,当发现过滤头变脏或长菌时,不可用超声洗涤,可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗涤;
 
  6、 实验结束后,一般先用水或低浓度甲醇水溶液冲洗整个管路30分钟以上,再用甲醇冲洗。冲洗过程中关闭D灯、W灯;
 
  7、 关机时,先关闭泵、检测器等,再关闭工作站,然后关机,最后自下而上关闭色谱仪各组件,关闭洗泵溶液的开关;
 
  8、 使用者须认真履行仪器使用登记制度,出现问题及时向老师报告,不要擅自拆卸仪器。
 
  (续)
 
  1、 操作过程若发现压力很小,则可能管件连接有漏,注意检查。当出现错误警告(各组件指示灯均为红色),一般为漏液,其中一个感应器中已有溶剂,漏液故障排除后,擦干,点击On line操作界面中的Instrument/System Off,然后再点击操作界面中的Instrument/System On即可。
 
  2、 连接柱子与管线时,应注意拧紧螺丝的力度,过度用力可导致连接螺丝断裂。柱接头处易发生漏液,可能情况为接头Fittings中间的管子未和接口处贴紧。不同厂家的管线及色谱柱头结构有差异,最好不要混用,必要时可使用PEEK管及活动接头;
 
  3、 操作过程若发现压力非常高,则可能管路已堵,应先卸下色谱柱,然后用分段排除法检查,确定何处堵塞后解决。若是保护柱或色谱柱堵塞,可用小流量流动相或以小流量异丙醇冲洗,还可采用小流量反冲的办法(新柱不提倡),若还是无法通畅,则需换柱;
 
  4、 运行过程中自动停泵,可能为压力超过上限或流动相用完;
 
  5、 样品瓶中样品较少,自动进样器进样针无法到达液面,可采用调低进样针进样高度的办法,注意设置时不要使进样针碰到瓶底,微量样品分析应使用微量样品瓶;
 
  6、 自动进样器进样针未与样品瓶瓶口对准时,需重新定位。
 
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